次世代シーケンサー（Next-Generation Sequencer, NGS）は、DNAの塩基配列を高速かつ大量に読み取る技術で、従来のサンガーシーケンシングと比較して、劇的なスループットの向上を実現しています。 N…

CBB（Coomassie Brilliant Blue; クマシーブリリアントブルー）染色は、SDS-PAGE後のポリアクリルアミドゲルの染色試薬です。 本記事では試薬メーカーの販売するCBB染色液を価格とともに紹介し…

SDS-PAGEはタンパク質電気泳動の代表的な手法のひとつです。 タンパク質を扱う研究者や学生の中には、ほぼ毎日のようにSDS-PAGEをされている方もいらっしゃるでしょう。本記事では、市販されているSDS-PAGE用の…

目次（見たい項目をクリック） 植物からのDNA抽出について植物DNAの抽出に必要な試薬Edward extraction bufferの組成と作り方（50mL）植物DNAの抽出に必要な装置・機器類植物のゲノムDNAの抽出…

Alexa Fluorは、蛍光顕微鏡、フローサイトメトリーなど蛍光検出のアプリケーション用色素としてよく使用されています。 Richard Paul Hauglandによって発明され、彼の息子のAlexにちなんで命名され…

目次（見たい項目をクリック） 創傷治癒アッセイ（Scratch Wound Healing Assay; スクラッチアッセイ）とは？必要な試薬類試薬の調製必要なラボウェア解析ソフトウェアプロトコル：創傷治癒アッセイ（Sc…

アガロースゲル電気泳動は、DNA を分子量（塩基対の数）によって分離し、可視化する実験手法です。 負に帯電しているDNAをアガロースゲルの中を通って陽極方向へ移動させます。短いDNAは、アガロースゲルの網目構造にトラップ…

銀染色は、SDS-PAGE（タンパク質電気泳動）後のゲル中のタンパク質を染色する代表的な手法です。 銀染色はクマシーブリリアントブルー（CBB）染色よりも手間はかかりますが、数ngレベルのタンパク質を検出できるため、微量…

CBB（Coomassie Brilliant Blue; クマシーブリリアントブルー; CBB）は、SDS-PAGEゲルの染色、Blue Native-PAGE（ブルーネイティブペイジ; BN- PAGE）、タンパク質…

フェノール/クロロホルム法を用いて大腸菌からゲノムDNA（gDNA）を回収する方法をわかりやすく紹介します。市販の抽出キットは使用しません。試薬の作り方も記載しています。 目次（見たい項目をクリック） 大腸菌からのゲノム…

X-Galを用いたブルー・ホワイトセレクションの原理とプロトコルを紹介します。ブルー・ホワイトセレクション（Blue/white selection; 青白選択）は、ブルー・ホワイトスクリーン（Blue/white sc…

ブラッドフォードプロテインアッセイ（Bradford protein assay）は、サンプルに含まれるトータルタンパク質の濃度を測定する手法のひとつで、1976年にMarion Bradford博士によって発明されまし…

細胞への DNA のトランスフェクション（遺伝子導入）は、分子生物学において欠かせない実験手法です。最近では、脂質ベースのトランスフェクション試薬が数多く市販されていますが、効率的かつ安価な方法として、DNAとりん酸カル…

免疫沈降法(IP;Immunoprecipitation)は、ターゲットタンパク質の特異的な精製を可能にする方法です。ターゲットタンパク質に対する抗体をセルライセートなどトータルタンパク質と反応させることで、抗体がサンプ…

目次（見たい項目をクリック） イオン交換クロマトグラフィーの原理 タンパク質と担体を結合させる タンパク質を溶出する 塩化ナトリウムで溶出 pHの変化で溶出 イオン交換クロマトグラフィーの原理 イオン交換クロマトグラフィ…